在細(xì)胞生物學(xué)研究與體外實(shí)驗(yàn)設(shè)計中，細(xì)胞的貼壁或懸浮生長特性是決定培養(yǎng)方案、實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果解讀的關(guān)鍵前提。針對 “巨噬細(xì)胞是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞” 的核心問題，需從其體內(nèi)生理功能、體外培養(yǎng)行為、分子機(jī)制及特殊狀態(tài)辨析四方面展開技術(shù)解析 —— 科學(xué)證據(jù)表明，巨噬細(xì)胞是典型的貼壁細(xì)胞，其貼壁生長特性并非單純的體外培養(yǎng)表型，而是與其執(zhí)行吞噬、免疫調(diào)節(jié)等核心功能的生物學(xué)本質(zhì)深度綁定，僅在特定病理或人為干預(yù)條件下才會出現(xiàn)短暫懸浮狀態(tài)，且不改變其貼壁細(xì)胞的根本屬性。

一、巨噬細(xì)胞的生物學(xué)本質(zhì)：貼壁依賴是體內(nèi)功能實(shí)現(xiàn)的基礎(chǔ)

從體內(nèi)生理狀態(tài)來看，巨噬細(xì)胞的分布與功能執(zhí)行均依賴其黏附能力，這是判定其為貼壁細(xì)胞的核心生物學(xué)依據(jù)。巨噬細(xì)胞起源于骨髓造血干細(xì)胞，經(jīng)單核細(xì)胞分化成熟后，廣泛分布于全身組織器官中，如肝臟中的庫普弗細(xì)胞、肺部的肺泡巨噬細(xì)胞、結(jié)締組織中的組織細(xì)胞等 —— 這些細(xì)胞并非游離于體液中，而是通過表面黏附分子（如整合素家族的 α5β1、αMβ2，黏附分子 CD44）緊密結(jié)合于組織基質(zhì)（如膠原蛋白、纖連蛋白）或血管內(nèi)皮細(xì)胞表面，形成穩(wěn)定的 “錨定狀態(tài)”。

這種貼壁狀態(tài)是其功能實(shí)現(xiàn)的必要前提：一方面，只有通過黏附于組織微環(huán)境，巨噬細(xì)胞才能感知周圍病原體入侵或細(xì)胞損傷信號（如趨化因子 CCL2），并通過 “黏附 - 偽足延伸 - 遷移” 的動態(tài)過程向病灶部位聚集；另一方面，吞噬功能的執(zhí)行依賴貼壁介導(dǎo)的細(xì)胞骨架重組 —— 當(dāng)巨噬細(xì)胞識別到細(xì)菌、凋亡細(xì)胞等靶標(biāo)時，需通過貼壁固定自身位置，再通過肌動蛋白聚合形成偽足包裹靶標(biāo)，完成吞噬體形成與降解。若失去貼壁支撐，巨噬細(xì)胞的遷移速率會下降 80% 以上，吞噬效率降低 90%，且無法正常分泌 TNF-α、IL-6 等免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，直接證明貼壁特性與其生理功能的不可分割性。

二、體外培養(yǎng)的技術(shù)驗(yàn)證：貼壁生長是常規(guī)培養(yǎng)的必需條件

體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)是直觀驗(yàn)證巨噬細(xì)胞貼壁特性的關(guān)鍵技術(shù)手段，其生長狀態(tài)與培養(yǎng)條件的關(guān)聯(lián)可通過多維度實(shí)驗(yàn)觀察：

在常規(guī)培養(yǎng)體系中（如含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，37℃、5% CO?環(huán)境），巨噬細(xì)胞（無論是原代分離的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞、人外周血單核細(xì)胞分化的巨噬細(xì)胞，還是細(xì)胞系如 RAW264.7）均需依賴培養(yǎng)容器表面的黏附位點(diǎn)才能正常生長。若使用普通聚苯乙烯培養(yǎng)皿，巨噬細(xì)胞接種后 1-2 小時內(nèi)即開始黏附，6-8 小時完全鋪展，形態(tài)從懸浮時的圓形轉(zhuǎn)變?yōu)樗笮?、多角形或不?guī)則形，細(xì)胞伸出多個突起（如絲狀偽足、板狀偽足），與培養(yǎng)皿表面形成穩(wěn)定的黏附連接；若使用超低吸附培養(yǎng)皿（表面經(jīng)親水涂層處理，抑制細(xì)胞黏附），巨噬細(xì)胞則無法正常黏附，始終保持圓形懸浮狀態(tài)，且 24 小時后活性顯著下降（活細(xì)胞比例從 95% 以上降至 60% 以下），48 小時后出現(xiàn)大量凋亡，證明貼壁是其維持活性與增殖的必需條件。

進(jìn)一步的分子機(jī)制驗(yàn)證顯示，巨噬細(xì)胞的貼壁過程依賴黏附信號通路的激活：當(dāng)細(xì)胞表面整合素與培養(yǎng)皿表面的纖連蛋白結(jié)合后，會觸發(fā)黏著斑激酶（FAK）磷酸化，進(jìn)而激活 PI3K/Akt、Ras/ERK 等信號通路，調(diào)控細(xì)胞骨架重組與基因表達(dá)（如上調(diào)細(xì)胞周期蛋白 Cyclin D1，促進(jìn)細(xì)胞增殖）。若加入整合素抗體（如抗 αMβ2 抗體）或 FAK 抑制劑（如 PF-573228），會顯著抑制巨噬細(xì)胞的黏附與鋪展，即使在普通培養(yǎng)皿中也會呈現(xiàn)部分懸浮狀態(tài)，且細(xì)胞功能（如 LPS 誘導(dǎo)的 TNF-α 分泌）顯著受抑 —— 這一實(shí)驗(yàn)結(jié)果從分子層面證實(shí)，貼壁特性并非巨噬細(xì)胞的 “被動生長選擇”，而是由其內(nèi)在信號通路調(diào)控的 “主動功能需求”。

三、特殊懸浮狀態(tài)的辨析：非生理?xiàng)l件下的暫時性表型

在實(shí)際研究中，偶爾會觀察到巨噬細(xì)胞的懸浮現(xiàn)象，需明確這些情況的特殊性，避免混淆其細(xì)胞類型歸屬。常見的特殊懸浮場景主要分為兩類：

一類是體內(nèi)病理狀態(tài)下的短暫循環(huán)：在急性炎癥（如細(xì)菌感染）初期，骨髓中的單核細(xì)胞會釋放入血，以懸浮狀態(tài)隨血液循環(huán)遷移至炎癥部位，隨后分化為巨噬細(xì)胞并黏附于組織基質(zhì) —— 但需注意，循環(huán)中的單核細(xì)胞并非成熟巨噬細(xì)胞，其懸浮狀態(tài)是遷移過程中的 “過渡形態(tài)”，一旦分化為成熟巨噬細(xì)胞，必然進(jìn)入貼壁狀態(tài)；若單核細(xì)胞無法正常黏附分化（如黏附分子缺陷），則會導(dǎo)致免疫功能障礙，進(jìn)一步證明成熟巨噬細(xì)胞的貼壁必然性。

另一類是體外人為干預(yù)的實(shí)驗(yàn)條件：例如，在研究巨噬細(xì)胞的 “懸浮活化” 機(jī)制時，會使用含高濃度甲基纖維素的培養(yǎng)基（增加黏度抑制黏附），或通過磁力攪拌使細(xì)胞保持懸浮 —— 但這類懸浮狀態(tài)是實(shí)驗(yàn)設(shè)計的 “人為誘導(dǎo)結(jié)果”，并非巨噬細(xì)胞的常規(guī)生長狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，人為懸浮的巨噬細(xì)胞會出現(xiàn)功能異常，如吞噬能力下降、抗炎因子 IL-10 分泌增加，且去除干預(yù)后（如更換普通培養(yǎng)基），細(xì)胞會迅速重新貼壁并恢復(fù)正常功能，說明懸浮狀態(tài)無法維持其生理活性。

四、貼壁特性的技術(shù)意義：指導(dǎo)巨噬細(xì)胞研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計

明確巨噬細(xì)胞的貼壁細(xì)胞屬性，對體外實(shí)驗(yàn)設(shè)計具有重要技術(shù)指導(dǎo)價值。在常規(guī)培養(yǎng)中，需優(yōu)先選擇經(jīng)表面處理的培養(yǎng)容器（如多聚賴氨酸包被皿），確保細(xì)胞黏附效率；若需進(jìn)行遷移實(shí)驗(yàn)（如 Transwell 實(shí)驗(yàn)），需在小室膜表面鋪覆基質(zhì)膠，模擬體內(nèi)黏附微環(huán)境，避免因黏附不足導(dǎo)致遷移結(jié)果誤判；在吞噬實(shí)驗(yàn)中，需保證巨噬細(xì)胞完全貼壁鋪展，否則偽足無法有效形成，會導(dǎo)致吞噬率檢測值偏低。

同時，這一特性也為巨噬細(xì)胞功能研究提供了技術(shù)靶點(diǎn) —— 通過調(diào)控貼壁相關(guān)分子（如整合素、FAK），可干預(yù)其功能狀態(tài)，例如抑制 FAK 活性可降低腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的黏附與侵襲能力，為腫瘤免疫治療提供新策略。

綜上，從生物學(xué)本質(zhì)、體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證到特殊狀態(tài)辨析，均明確證明巨噬細(xì)胞是典型的貼壁細(xì)胞。其貼壁生長特性不僅是體外培養(yǎng)的技術(shù)需求，更是體內(nèi)功能執(zhí)行的生理基礎(chǔ)，短暫的懸浮狀態(tài)僅為特殊條件下的過渡形態(tài)，不改變其貼壁細(xì)胞的根本屬性。這一結(jié)論為巨噬細(xì)胞相關(guān)研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計、結(jié)果解讀及技術(shù)創(chuàng)新提供了核心理論依據(jù)，是細(xì)胞生物學(xué)與免疫學(xué)研究中需重點(diǎn)關(guān)注的基礎(chǔ)認(rèn)知。